远古时期，天地一片混沌，还没有完全成形，人世间一片混乱、骚动。人间界形成之初，人类还没有计时、计年的观念，人们总是忘记自己出生在哪一年，过了多少岁，完全没有辈分的观念。为了解决人类的困扰，仙界的统治者--玉皇大帝想出个好办法，决定用动物名称来代表年份。于是，玉皇大帝派遣信使-信天翁广发英雄帖，召集动物界的各路英雄好汉参与遴选，以选出十二只动物担任生肖属相。 经过层层筛选，已经决定了11个动物了，就要决定猫头鹰为最后一个入选者的时候，意外发生了，小老鼠林可恰好掉到了挑选名单的画册上，将自己的画像刻到了画册上，因此幸运的成为最后一个入选者，在它之前牛、虎、兔子、龙、蛇、马、羊、猴子、鸡、狗、猪都已经入围。 被选中参加生肖比赛的十二只动物，为了争夺生肖王的头衔并决定顺位，证明自己拥有最优秀的能力，足以打败邪魔帮助人类，于是纷纷赶往擎天关接受严格的试验和磨难，在这段艰苦的路程中，谁能赶得第一就是生肖之王。 由于小老鼠林可是替主人猫来报名，自己却得到了机会，还是抢的猫头鹰的机会，因此猫头鹰和猫就一路追杀老鼠林可。林可为了躲避它们，和牛奥里结成伙伴一路前行，奔向擎天关。 狐狸挑拨老虎欺负兔子，兔子说“我们都是12生肖，你要吃了我，玉皇大帝会怪罪的”，因此，老虎放过了兔子，还和兔子一同前去追赶已经出发的牛。嫉妒的狐狸在抓兔子时，抓住了兔子的尾巴，兔子为了逃脱，扯断了尾巴，这就是兔子尾巴为什么短的原因。 蛇在过一条河的时候发愁，得到了龙的帮助。龙在和蛇戏耍的时候给人间造成大水，带来灾难。为了弥补损失，必须找牛来帮忙开山垦水。其他的动物都在忙，唯有猴子不着急，反而在其他动物必经的路上卖起了水果。 牛奥里驮着老鼠林可一直赶路，却发生意外，由于山体崩塌，牛悬在山崖上。林可做起了思想斗争，想当生肖王的话就不能救牛，但最后还是良知占了上方，通过一根绳子将老牛奥里拉了上来。 牛驮着老鼠终于赶到了擎天关，最后关头林可一跃成为了第一名。牛奥里也为林可感到激动，因为奥里是奉命协助林可的。老虎和兔子也赶到了，但对自己获得第三名很生气。龙和蛇也来了，龙急着找牛回去帮忙解决自己带来的灾难，因此急忙和牛往回赶。 马、羊、猴子它们遭到树怪的袭击，多亏龙的帮忙才过关，最终也顺利到达。小懒猪慢腾腾的最后一个也到达了。 玉皇大帝宣布，它们12个动物轮流值班，既管日月，也管时辰。12年一个轮回，以后就是人类的生肖，而老鼠就是生肖王。由于小老鼠幸运的得到了生肖王，从此以后老鼠和猫以及猫头鹰就成了死对头！